western blot（关于western blot的简要介绍）

关于western blot，有许多人不了解，那么下面来看看小程对western blot的相关介绍。

western blot

1、什么是Westernblot？Westernblot是一种将电泳与KIJSA相结合的技术。可分为电泳、转印和酶免疫分析三个阶段。Westernblot方法结合了电泳的高分辨率和酶免疫分析的高灵敏度和特异性，是一种可用于分析样品成分的免疫分析方法。

2、Westernblot的应用：Westernblot是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法，是一种对蛋白质进行定性和半定量分析的方法。使用特异性抗体对经凝胶电泳处理的细胞或生物组织进行染色，通过分析染色的位置和深度获得被分析细胞或组织中特定蛋白质的表达信息。

3、蛋白质分析中使用的Western杂交方法类似于DNA分析中使用的Southern杂交方法，其中通过电流分离的组分从凝胶转移到固体支持物上，并且通过使用针对特定氨基酸(Western印迹方法)或核苷酸(Southern杂交方法)序列制备的特定样品作为探针来检测相同或相似的序列。对于蛋白质，常用的探针是抗体，它与附着在固相支持物上的目标蛋白质的表位发生特异性反应。Westernblot方法的主要优点是它可以从生物组织的粗提物或部分纯化的粗提物中检测和鉴定几种特定的蛋白质。通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)分离的蛋白质从聚丙烯酰胺凝胶电转移到合适的印迹膜上，然后结合到膜上的一种或多种蛋白质通过与敏感检测系统偶联的抗体被识别。这种技术的灵敏度可以达到固相放射免疫分析的标准水平，不需要像junimmuno沉淀那样对目标蛋白进行放射标记。因此，Westernblot方法对于鉴定和定量非放射性标记蛋白质的复杂混合物中的一些特定蛋白质是非常有用的。另外，由于蛋白质的电泳分离几乎都是在变性条件下进行的，所以不需要考虑目的蛋白和外源蛋白的溶解、聚集和共沉淀等许多问题。

4、bio-rad Trans-Blot transfer slot是一种多功能仪器，适用于各种蛋白质印迹应用。可灵活设置多组参数，电压设置可调(从30V过夜转移到200V 1小时快速实验)。标准转印的电极间距设置为8厘米，高强度转印的电极间距设置为4厘米。采用特殊的冷却芯和水循环冷却装置调节温度——是天然酶(4)或高强度转移的理想选择，不会随着转移时间的增加(最长24小时)造成缓冲液耗竭。

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